文献三氧自血疗法对肺结核患者细胞免疫功能

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结核病是严重危害人民群众健康的慢性传染病，我国是结核病高负担国家之一，排全球第二。细胞免疫在结核病的发生、发展及预后中起重要作用，部分肺结核患者的细胞免疫功能出现明显下降，提高肺结核患者的细胞免疫功能有助于改善患者治疗效果。三氧自体血疗法(O3－AHT)从本世纪初开始在我国逐渐开展，已广泛应用临床多个科室。O3－AHT是通过医用三氧发生器在安全惰性环境下对医用纯氧进行处理后得到的不含有毒物质的纯净三氧气体，将一定浓度氧气和三氧混合气体与自体血等容量混匀，再回输到体内的一种治疗。医院自年11月开展三氧自血疗法联合抗结核药物治疗肺结核患者，本研究旨在三氧自血疗法对活动性肺结核患者细胞免疫功能的影响，为肺结核的免疫治疗新方法提供依据。

对象和方法

研究对象：

本研究以年1月—年2月在医院外科住院治疗的活动性肺结核患者连续病例为研究对象。

纳入标准：符合“WS－肺结核诊断”标准和接受抗结核治疗的活动性肺结核患者。

排除标准：

(1)三氧自血疗法禁忌症者，包括葡萄糖－6－磷酸脱氢酶缺乏症，Graves病，血小板减少低于50×/L，严重的凝血障碍，严重的不稳定性心血管病，急性心肌梗死，急性酒精中毒，中、重度贫血，癫痫，妊娠，严重肝功能不全，月经期，血色素沉着病，接受铜或铁剂治疗，抗凝剂(枸橼酸钠)过敏的患者;

(2)合并HIV等免疫缺陷疾病的患者;

(3)研究前3个月内使用免疫增强剂或抑制剂的患者;

(4)不愿参与本研究者，未完成本研究者。

研究方法：

研究分组将观察对象分为研究组和对照组。以研究期间纳入患者入院治疗时间先后编号，单号为研究组(三氧自血疗法+抗结核治疗组)，双号为对照组(单纯抗结核治疗组)。

治疗方案：

研究组在抗结核治疗方案为HＲEZ(H异烟肼、Ｒ利福平、E乙胺丁醇、Z吡嗪酰胺)的基础上行三氧自血疗法。三氧自血疗法为每次抽取患者外周静脉血液ml与三氧气呈1∶1的比例混合3～5min，30min内回输完毕，1次/d，10d为1个疗程，三氧气由德国卡特三氧治疗仪制备(浓度:25～40μg/ml)。抗结核治疗药物中，异烟肼(H)0.3g/d，利福平(Ｒ)0.45g/d，乙胺丁醇(E)0.75g/d，吡嗪酰胺(Z)1.25g/d，以上抗结核药物均由沈阳红旗制药有限公司生产。对照组单纯接受HＲEZ抗结核治疗，不使用三氧自血疗法。

观察指标和实验方法：

本研究以患者外周血T细胞亚群CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD45+、CD56+、CD19+作为免疫功能的观察指标。对所有病例在治疗前和开始治疗10d后，分别采集空腹静脉血3ml(2管)，置入EDTA抗凝，经r/min离心后，取上清液分装，－20℃冰箱保存备用待检测，采用双抗夹心ELISA法检测外周血T细胞亚群各指标。试剂盒购自美国BD公司，流式细胞检测严格按照说明进行操作。

伦理学：

本研究经医院医学伦理委员会批(02)，对纳入研究的所有患者或授权人在治疗前均签订“三氧自血疗法改善结核病患者免疫功能研究知情同意书”。

统计学分析

所有病例数据采用EXCEL表整理，用SPSS22.0统计软件包进行分析。计量资料以均数±标准差(珋x±s)表示，主要检测样本均行正态性检验。两组治疗前后和两组间指标比较采用t检验，结果均以P＜0.05为差异有统计学意义。

结果

纳入患者的一般情况研究期间共纳入共例患者，因各种原因退组15例(研究组6例，对照组9例)。共纳入病例例，其中男75例，女58例。研究组71例［男性34例，年龄(42±5.2)岁;女性37例，年龄(40±9.1)岁］，对照组62例［男性30例，年龄(43±5.2)岁;女性32例，年龄(45±3.7)岁］。两组患者在性别、年龄的差异无统计学意义(P＞0.05),见表1：

治疗前两组患者外周血T淋巴细胞亚群指标的比较研究组与对照组在治疗前外周血T淋巴细胞亚群的各项指标的差异均无统计学意义(t=0.～1.，P=0.～0.)。见表1。2.3治疗后两组患者外周血T淋巴细胞亚群指标的比较两组除了CD4+/CD8+比值和CD19+%CD45+%差异没有统计学意义外，研究组治疗后外周血T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+、CD56+高于对照组，两组的差异有统计学意义(t=3.～4.，P=0.～0.);而两组CD4+/CD8+、CD19+、CD45+的差异无统计学意义(t=0.～1.26，P=0.～0.95)，见表2

研究组治疗前后外周血T淋巴细胞亚群指标的比较治疗后研究组外周血T淋巴细胞亚群CD4+、CD4+/CD8+、CD56+、CD45+高于治疗前，其差异有统计学意义(t=2.～5.，P=0.～0.);而CD8+、CD19+的差异无统计学意义(t=0.～1.，P=0.～0.)，见表3。

对照组治疗前后外周血T淋巴细胞亚群指标的比较对照组治疗前外周血T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+高于治疗后，其差异有统计学意义(t=3.～4.，P=0.～0.);而治疗前后CD4+/CD8+、CD45+、CD56+、CD19+的差异无统计学意义(t=0.～0.，P=0.～0.)。见表4。

不良反应在研究期间，三氧自血疗法联合抗结核治疗组患者没有发生三氧自血治疗相关的不良反应。

结论

结核病分枝杆菌所引起的保护性免疫反应是依赖细胞介导免疫。在结核病细胞介导免疫反应中起主要作用的是T细胞亚群中CD4+T细胞和CD8+T细胞。NK细胞在对抗MTB的先天性免疫中起关键作用。NK细胞在体内存在正负双相调节现象。CD8+细胞可产生颗粒素、穿孔素来杀死细胞内外的结核分枝杆菌。B细胞在结核病的发生中起重要作用，CD19+B细胞被认为是一种具有调节功能的B细胞。因此，本研究以患者外周血T细胞亚群CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD45+、CD56+、CD19+作为免疫功能的测量指标。三氧在体内可引起多种生理反应，如改善细胞氧供及代谢，激活抗氧化酶，清除自由基，激活、调节免疫等。O3－AHT可通过氧化、诱导产生活性氧，作为生物信使诱导机体产生多种细胞因子，激活免疫活性细胞，从而有效调节机体免疫反应。李丽等用三氧疗法治疗淋巴瘤患者，CD4+细胞、CD4+/CD8+明显提高。但三氧自血疗法在结核病领域文献报道较少。本研究表明，研究组与对照组在治疗前外周血T淋巴细胞亚群的各项指标比较无明显差异，研究组治疗后外周血T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+、CD56+高于对照组。此外，研究组治疗后外周血T淋巴细胞亚群CD4+、CD4+/CD8+、CD56+、CD45+高于治疗前，提示三氧自血疗法能够改善患者的细胞免疫功能，与相关文献结果相近。结核患者的免疫功能状态对疾病预后、演变起重要作用，免疫功能低下往往会导致结核播散等，本研究结果显示，对照组治疗前外周血T淋巴细胞亚群CD4+和CD8+高于治疗后，其可能原因是抗结核病治疗时间太短有关。

文章来源:

石自力,邓高焱等.三氧自血疗法对肺结核患者细胞免疫功能的影响[J].实用预防医学,,27(1):30-32.

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